首创大地有限公司质检部主任付静告诉记者，他们希望有一种方法能对生产工艺过程实行在线控制。因为其他方法都很麻烦，需要时间长，影响生产进度，有的问题还发现不了。用这种方法可以对关键工序、关键点进行控制，目前他们已用于生产一年多了，解决了许多问题。从原料、半成品到成品，400余种配方颗粒全部应用；还将其作为企业质量管理的一种内控方法，进行药品定性的在线鉴别，解决了很多问题。比如有的药材按药典和经验鉴别为同一种药，但其红外图谱与地道药材却相差很大，药典上也没有规定相应的鉴别项目；实验室家具有的药材是沉积货，肉眼根本看不出来，红外光谱却一目了然。综上所述：不同批次溶栓胶囊质量的优劣可通过酰氨I、Ⅱ带和l155/cm、1084/cm、1055/cm附近淀粉等特征吸收峰的相对强度判断；四个批次的辅料含量顺序为：2000．1>2001．1>2002．1>2003．1。首都医科大学张祖询等人的生物活性实验也给出相同的顺序，进一步说明辅料添加的多少直接影响药物的疗效。红外光谱法及二阶导数谱的结合分析方法无损快速准确，对不同批次的溶栓胶囊的区别鉴定获得较为满意的分析结果。同时对各个批次的溶栓胶囊做重复性实验，实验发现各个批次的溶栓胶囊均有一定的不均匀性。2000．1批次的重复性实验红外谱图，进行选点归一化处理(选取1084cm 处对应的点)，可看出测的谱各吸收峰强度具有一定的波动性，说明目前利用SiO2崩解剂等溶栓胶囊制备技术依然无法完全解决溶栓胶囊成分混合均匀难的问题。溶栓原料的165l/cm、1549/cm、1451/cm、1405/cm、1238/cm 吸收峰和地龙的1655/cm、1545/cm、1452/cm、1398/cm、1236/cm吸收峰分别相差4、4、1、7和2个波数。由于溶栓原料从地龙提取而来，可知溶栓原料的蛋白(酶)丰度增加，实验室家具尤其是含有伯酰氨基团的蛋白(1405/cm对应伯酰氨的酰氨Ⅲ带的吸收峰。)有很明显的增加，并且添加了少量的Si02辅料(1079/cm这个宽而钝的峰强有所增加)。二阶导数谱能够提高谱图的表现分辨率，能把复杂体系中原来重叠的波峰区分开，增大红外谱图的分辨率 。本文采用红外光谱与二阶导数谱的结合对溶栓胶囊进行无损快速鉴别研究。傅立叶变换红外光谱法(FTIR)是一种普遍且常用的分析方法，由于实验室家具具有宏观整体鉴定复杂体系的优点以及无损快速的特点，越来越广泛的用于药用动、植物的真伪优劣鉴别研究领域。

   孙素琴等人在该领域已进行系统化的质控研究。可以看出1727/cm、1551/cm、1468/cm、1412/cm附近的基团振动峰都有明显的增强，1658/cm、1546/cm对应基团吸收强度的相对变化说明溶栓原料的蛋白含量有明显的增加，所含成分也有所变化。出现该结果是因为前面提到的制备溶栓原料时对地龙的蛋白有选择提取的缘故。不同批次的溶栓胶囊主要的差别在于酰氨I带、Ⅱ带对应的1651～1641/cm、1549～1545/cm吸收峰与1155/cm、1084/cm、1055/cm附近淀粉等的特征吸收峰的相对强度不一样。由于蛋白(酶)是溶栓胶囊的主要有效成分，酰氨I、Ⅱ带的峰越强说明有效成分含量越多；反之，1155/cm、1084/cm、1055/cm附近淀粉等的特征吸收峰带越强且酰氨I、Ⅱ带的出峰位置越偏向低波数，有效成分含量则相对越低。各个批次加入的辅料量(包括：淀粉、SiO2等)大小次序为：2000．1>2001．1>2002．1>2003．1。并可进一步看出，2000．1与2003．1的SiO2辅料含量相对较多，2001．1与2OO2．1的淀粉含量相对较多。此外，2003．1的溶栓胶囊的蛋白峰特别是酰氨I、Ⅱ带的峰和溶栓原料符合的非常好，实验室家具虽然添加一定量的辅料但是可以断定其疗效应该和原药疗效最为接近。孙素琴呼吁，以红外宏观指纹为主要手段，尽快建立起较完整的系统，先行鉴定起来，再由色谱法所获得的有效、指标成分的信息作补充或修正，两者互相佐证，从而真正建立起不违背中医药原则的中国特色的检测方法与系统。孙素琴说，单纯用指标成分作为中药的检测标准，这是西药的方法。我们主张用红外光谱做宏观质控，用指标成分佐证进行双控，以此作为中药的标准。我们需要接受各个学科的先进技术、理念，制定一个独特的、能真正体现中药理论的标准。现在有些药连定性问题都没解决好，我们制定标准，达到的首要目的应该是净化市场。可见，红外指纹图谱法最大的优势是“直接、快速、无损”。这一点，国家中医药管理局在资助“中药材光谱法快速检测系统”项目之时就体会到了。350余种配方颗粒，仅在两个星期内全部完成了红外光谱实验的测定。这让他们感到非常吃惊，从来还没见过这么快拿出结果的分析方法。据《本草纲目》记载，经现代中医理论证实，地龙(蚯蚓)性味咸寒，不但能通经络，活血化瘀，又能平肝泻火，故对瘀血阻于经络者多奇效。该溶栓胶囊是从北京东郊蚯蚓养殖场培殖的正蚓科双胸蚓属(Lumbficidae Bimastos)赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)中采用高科技提取出的蛋白水解酶，属纯中药多分酶制剂。主要成分为3种溶解血栓的酶，即纤溶蛋白溶解酶、纤溶酶原激活物和胶原酶，具有抑制血小板粘附作用，既能溶解已形成的血栓，又能抑制血管内新血栓的形成，适用于中风、半身不遂、肢体麻木、高血压症等心血管疾病。据临床发现，该药物的药效不是很稳定。因此，对该溶栓胶囊进行质控研究具有很大的现实意义。孙教授还说，实验室家具红外指纹图谱其实也并不难掌握，解谱有一定的规律性，只要掌握了规律，非常容易，大部分技术人员都会分析。摘要：本文采用红外光谱法及二阶导数谱对不同批次的溶栓胶囊(Plasmin capsules)进行无损快速鉴别研究。实验研究表明，不同批次的溶栓胶囊其蛋白(酶)的成分都和原料有不同程度差别，并且加入的辅料的量也有较明显的不同。指纹图谱必须重复性好，谁做都应该是一样的。孙素琴等在起草制定《中药红外光谱分析方法通则》国家标准方法时，按照规程，需要4家实验室交叉验证，每家200个样品，每个样品重复3～5遍。验证结果显示，4家实验室的谱图对照，误差非常小，重现性非常好。以药材为例，实验室家具采用清华大学孙素琴教授所创立的“红外宏观指纹谱图鉴定法”测定中药的红外光谱，不需要提取分离，只需将药材研磨成粉末，经典压片法压片，即可直接测试，将所得红外光谱或其导数谱等宏观指纹谱与公认的、药效稳定的药材、成药相应的标准图谱作对照，反映的是药材的整体信息。采用色谱方法测定中药指纹图谱，一般需要通过不同的分离手段与色谱条件将成分分类，测定主成分的色谱指纹谱，采用对照品或化合物进行对照鉴定，最后通过若干张图反映药材相对完整的信息。

   近几年，“指纹图谱”被作为中药现代化的一个代表，炒作得热闹非常。内行人都知道，色谱、光谱、波谱这三种方法均可用于获取中药指纹图谱。但不知为何，现在大家所说的“中药指纹图谱”似乎就成了色谱一种方法。有专家说，“光谱中的紫外和红外光谱所提供的信息较少，不能充分反映供试品的成分变化”，也许这就是红外光谱至今未被药典采用的原因？那么，红外光谱到底能不能作为中药的检测标准呢？辅料的添加量直接影响溶栓胶囊的生物活性。最后对各个批次的溶栓胶囊做重复性实验，实验室家具发现红外谱图有一定的波动，说明药品的均匀性较差。红外指纹图谱可直接解决中药宏观质量控制中的一个首要问题——中药的真伪鉴定。因为红外指纹图谱说不的，就一定有问题。据记者了解，2000年国家药典委员开始组织全国各方面的专家开展中药注射剂指纹图谱研究工作；随后，国家药品监督管理局也制定了中药注射剂2004年底必须实行指纹图谱标准管理的法规，计划2004年内完成74个中药注射剂指纹图谱的研究工作。而近期药典会召开的一次注射剂指纹图谱论证会上，中药注射剂指纹图谱(色谱法)的研究进展并不令人满意，只有5个系列的19个品种进行了情况汇报。在处方统一、工艺统一、药材地区限制、质量标准统一的基础上，其指纹图谱只能做到0.8的相似度。专家提出，注射剂指纹图谱是很重要的指标，但不是惟一控制质量的标准，应与其他活性成分的含量测定相结合。此外，成本高，不易普及。提要 采用静电离子色谱法(EIC), 在ODS载体上涂覆胆汁酸诱导体胶束(CHAPS)进行阴离子和阳离子的同时分离. 以示差析光检测器检测, 分别以纯水、 碳酸盐、 磷酸盐和十二烷基磺酸盐电解质溶液为流动相, 探讨Na2SO4和NaBr, Na2S2O3, NaF和NaNO3, NaNO3和KNO3各离子对的分离条件和分离效率, 以及静态磁场对静电离子色谱的保留时间和分离效率的影响. 同仁堂中药所的一位科研人员这样评价，用这个方法，药材入库检测含量快捷；生产过程可随时进行在线控制；成药鉴别有优势，不需打开包装，固体的都可检测。实验室家具鉴别不同品种、不同产地、不同采收季节的药材意义更大。比如六味地黄丸，其他方法只能提供部分信息，不能区分人为加入的化学成分，红外光谱法缺味都能看得出。红外方法操作容易，操作误差小；图谱可识别，解析图谱研究人员容易掌握。随着仪器的发展、完善，红外方法可以用于中药的质量标准。在静电离子色谱分离过程中, 由于采用涂覆同时带正/负两电荷的两性分子离子作固定相, 被分离的阴阳离子以离子配对形式被洗脱下来, 虽然可以用一种柱填料同时分离分析阴阳离子, 但必须配备不同种类的检测器以适应阴阳离子的在线检测. 在外加磁场作用下, EIC的不同种类流动相对各种离子对的分离效率、 选择性及其保留机制的影响及作用有待于进一步研究. 将静电离子色谱置于静态磁场(Nb磁铁, 160 mm×30 mm)中, 考察各离子对的分离效率和保留时间. 实验表明, 在外加磁场作用下, 纯水为流动相时, NaNO3和Na2S2O3离子对的保留时间稍向后位移（见图5）, 但二者的峰形状未发生变化. 这可能是在离子对形成和洗脱过程中, 由于外加磁场的作用, 使形成的离子对与涂覆在载体上胆汁酸盐胶束所带的正负电荷静电吸引和排斥作用力发生变化, 打破了原来的平衡状态， 使离子对的保留时间发生位移.由此可见，色谱指纹法目前离中药材的分析鉴定也还有漫长的路要走。而寻找快速鉴别中药的标准方法以及实现中药质量的可控性，建立具有我国独立知识产权的中药质量检验标准体系，是实现中医药标准化、现代化、进入国际市场必须解决的关键性问题，解决这一难题，我们是不是也该学学肖培根院士对待中药红外指纹图谱的态度，百花齐放，百家争鸣。如果能用简单的方法解决这个难题，应该也是中药现代化的一大进步。采用红外光谱法进行鉴别，在化学领域和合成化合物中已得到广泛的应用，但用于中药的鉴别还不多。实验室家具因为光谱法具有的加和性，红外光谱法用于成分复杂的中药的鉴别并不专属。目前仅用于冬虫夏草、珍珠、蛤蟆油、五灵脂等中药的鉴别分别以碳酸盐、十二烷基磺酸钠为流动相得到的静电离子色谱分离图如图3所示. 由图3可见NaBr和Na2SO4可以完全分离, 与纯水为流动相相比, NaBr和Na2SO4的分离效率提高, 但保留时间增加. 特别是以十二烷基磺酸钠(表面活性剂)为流动相时, 使NaBr的保留时间延长(见图3(b)), 这说明表面活性剂的存在将对离子对的分离效率产生重要影响. 可以认为, 在流动相中加入电解质溶液, 除样品离子与固定相相互作用外, 流动相中电解质也参与了与固定相之间的静电吸引和排斥作用, 由于各离子对和电解质与固定相相互竞争的静电作用, 提高了各离子对的分离度. 纯水为流动相时, Na2SO4和NaBr， KNO3和NaNO3， Na2S2O3和NaF+NaNO3各离子对得到分离, 但NaF与NaNO3不能分离开.

   而磷酸盐为缓冲溶液时(图2), 不但Na2SO4和NaBr得到分离, 而且Na2S2O3， NaF， NaNO3也可相互分离. 由图2可见, 与纯水流动相相比, 实验室家具流动相中磷酸盐的存在使各离子对保留时间和色谱峰形状发生变化, 虽然各离子对保留时间显著增加, 但出峰顺序未发生变化. 实验表明, 各离子对的保留时间与阴阳离子的半径、 电荷、 流动相种类和离子强度有关, 在流动相中加入不同种类的电解质溶液将有利于某些离子对的分离. 当流动相流速不同时, 各离子对的保留时间发生改变. 纯水为流动相时, NaBr和Na2SO4离子对的保留时间与纯水流速的关系. 实验表明, 当采用不同种类流动相时, 随着流动相流速的增加, 保留时间都有不同程度的缩短. 但要根据被分离的离子对的分离效率和分析速度来选择流动相流速, 本实验选择流动相流速为0.6 mL/min. 静电离子色谱法是利用在ODS载体上涂覆在同一分子内同时含有正/负两种电荷的胆汁酸诱导体胶束作固定相, 纯水或电解质溶液作流动相, 被测样品中的阴离子和阳离子通过纯粹的静电吸引、 离子配对后形成正、 负离子的缔合物(离子对), 由于被测离子的电荷和半径、 离子种类和离子浓度的不同, 实验室家具因此形成的各种离子对受涂覆在固定相上的表面活性剂所带的正/负电荷静电吸引和排斥作用力不同而相互分离. 分离后的离子对进入检测器进行定量检测. 实验表明, 用本法制备的静电离子色谱柱, 连续使用3个月未发现分离效率下降. 近年来离子色谱研究的一个重要趋势是研究各种分离效率高, 选择性好, 分析速度快, 可同时分析阴离子和阳离子的色谱柱. 研究的重点是将涂覆有生物表面活性剂的物质作离子色谱固定相, 并已在光学异构体和无机离子分离分析方面展示出独特的优越性和发展潜力. 1994年， Hu Wezhi等人[1～4]首先采用在一分子内含有正负电荷的两性离子分子的表面活性剂作色谱固定相, 实验室家具开创了静电离子色谱法. 本文利用自制的静电离子色谱柱, 选用不同种类流动相, 对含有不同阴离子的钠盐进行分离， 并初步探讨在磁场中静电离子色谱的保留行为. 付主任说，这种方法在产品定性方面有积极作用，比如白芍过去测含量只是测一个芍药苷，现在可以监测它的所有成分。不太放心时我们再多做个红外图谱看看，心里就塌实多了，对产品的质量和稳定性，信心更强了。她认为这种方法快速，操作简单、但需要有一个熟练的过程。红外光谱不能包罗万象，但可以与其他鉴别方法互为补充。他说，今年他们已经就为“近红外技术在中药质量方面的应用”研究立了项。她说，我们从红外很容易就能分辨的东西，为什么一定要采用更精密的方法，这不等于用万分之一的天平称萝卜白菜吗？现在中药质控的方法粗的(指用人工)太粗、细的(指用色谱)太细，中间缺少一个过渡的方法。红外是分子光谱仪器，更科学、更容易被国际上认可。红外在中药质控方面不是万能的，但离开它是万万不能的。因此，如果将红外光谱与色谱这两种方法的各自优势结合起来，互为补充，应该是中药质量控制的最佳选择。实验室家具可能就是因为方法、观念的不同，缺乏相互间的交流和沟通，专家对红外指纹图谱法在学术上、认识上也有一些争议。有专家认为，红外光谱不能定量，且谱图是叠加谱，没有用。还有人认为，红外光谱法直接测定中药，反映的是混合物的信息，测出的成分不是有效成分。只有分离提取、获取指标成分的信息才能说得清楚。但也有专家说，这种方法更符合中医药的整体、宏观理论。孙素琴教授带领的课题组从1998年起钻研中药红外指纹图谱，两次立题，7年来陆续得到国家中医药管理局和科技部110万元的经费资助，发表相关论文60多篇，出版一本专著。她说，我们人手不多，工作量极大，既要搞技术，又要申报项目，真的很困难。现在，方法刚刚建立，也已初步建起了中药红外指纹图谱数据库，但还需要做更大量、更仔细的实验研究，我们迫切需要国家支持建立更完整的数据标准库。